Фармацевтического факультета по токсикологической химии к практическому занятию №4 (4 курс, 8 семестр)
ТЕМА: Основы проведения общего (ненаправленного) анализа лекарственных веществ. ТСХ - скрининг лекарственных веществ.
1. Вопросы для проверки исходного (базового) уровня знаний:
1) Основы проведения общего (ненаправленного) анализа лекарственных веществ.
2) ТСХ-скрининг. Применение метода ТСХ в скрининг-анализе лекарственных веществ. Образцы исследования, полученные в результате фракционного извлечения токсических веществ. Поэтапное хроматографическое разделение токсических веществ в образцах.
3) Комбинированное использование систем растворителей. Общие и частные системы растворителей. Сорбенты, применяемые для хроматографического разделения. Принципы комбинированного использования химических реагентов и физико-химических методов обнаружения. Подтверждающий анализ. Интерпретация результатов скрининга.
4) Общая характеристика методов анализа. Методы обнаружения и определения лекарственных веществ при проведении судебно-химической экспертизы. Пределы обнаружения, специфичность. Возможности использования в химико-токсикологическом анализе. Значение в программе комплексного использования методов. Обработка результатов качественного анализа при использовании конкретного метода. Интерпретация результатов исследования.
5) Химические методы, их достоинства и недостатки. Типы основных реакций, химизм. Пределы обнаружения и специфичность химических реакций окрашивания при проведении экспресс-тестов и в сочетании с хроматографическими методами. Осадочные реакции. Микрокристаллоскопические реакции. Биологические методы.
6) Фармакологические испытания и их значение при идентификации некоторых алкалоидов.
7) Хроматографические методы исследования (методы тонкослойной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, газо-жидкостной хроматографии).
8) Спектральные методы. Спектрофотометрия в УФ- и видимой областях спектра. Классификация органических соединений по электронным спектрам поглощения. Подготовка проб для исследования спектроскопическими методами. Флуоресценция и фосфоресценция. Масс-спектрометрия. Принципы масс-спектрометрии. Сочетание масс-спектрометрии с другими физико-химическими методами. Возможности метода и ограничения при использовании в химико-токсикологическом анализе.
9) Иммунологические методы анализа. Гомогенный и гетерогенный иммуноанализ. Перспективы развития иммунологических методов применительно к основным направлениям химико-токсикологического анализа. Комплексный подход при использовании методов анализа. Принципы рационального сочетания методов.
2. Целевые задачи:изучить методы изолирования лекарственных и наркотических веществ из биологических жидкостей при проведении ХТА.
Студент должен знать:
| Литература:
| 1. Формулу, химическое название, физико-химические, спектральные и хроматографические характеристики токсиканта, процедуру пробоподготовки биообъектов, способ (способы) выделения (изолирования) токсиканта.
2. ТСХ-скрининг.
3. Хромато-масс-спекроскопия в анализе наркотиков.
4. Физико-химические методы анализа производных амфетамина в биожидкостях, волосах, ногтях. Особенности пробоподготовки.
5. Иммуноферментный анализ: сущность, классификация, особенности, достоинства и недостатки. Использование в анализе на наркотики.
6. Дифференциальная УФ-спектрскопия в анализе производных барбитуровой кислоты.
7. Поляризационный флюороиммуноанализ мочи на наркотики.
8. УФ-спектроскопия производных фенотиазина.
Студент должен уметь:
1. Выбирать биообъект.
2. Выбирать способы пробоподготовки и изолирования (выделения) токсикантов.
3. Обосновать способы количественного определения выбранного Вами метода анализа.
4. Представить интерпретацию полученных результатов.
5. Дать заключение.
| Основная
1. Токсикологическая химия. Аналитическая токсикология: учебник / под ред. Р.У. Хабриева, Н.И. Калетиной.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 752с.
2. Токсикологическая химия: учебник для вузов / под ред. Т.В. Плетеневой.- изд. 2-е, испр. и доп.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005.- 512с.
3. Токсикологическая химия: электронный учебник / Н.И. Калетина, Е.А. Симонов.- М.: Русский врач, 2005. (CD-версия)
Дополнительная
4. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие / В.Г. Беликов.- изд. 3-е.- М.: Медпресс-информ, 2009.- 616 с.
5. Кукес, В.Г. Клиническая фармакология и фармакотерапия: учебник / В.Г. Кукес, А.К. Стародубцев.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.- 640 с.
6. Фармакология: учебник для фарм. вузов / под ред. Р.Н. Аляутдина.- 3-е изд., испр.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.- 592с.
7. Харитонов, Ю.Я. Аналитическая химия (аналитика): учебник / Ю.Я. Харитонов.- изд. 2-е.- М.: Высшая школа, 2001.- в 2 книгах.
| III. Задания для самостоятельной работы по изучаемой теме.
1) Дайте определение следующим терминам:
· Пробоподготовка.
· Нетрадиционные биообъекты.
· Поляризационный флюороиммуноанализ мочи на наркотики.
· ГЖХ в анализе лекарственных и наркотических веществ.
· ВЭЖХ в анализе лекарственных и наркотических веществ.
· ГЖХ-скрининг лекарственных и наркотических веществ.
· Хромато-масс-спектрометрия в анализе опиатов и каннабиноидов.
2) Перечислить исследуемые пробы от живых лиц:
· __________________________________________
· __________________________________________
· __________________________________________
· __________________________________________
3) Исследуемые пробы при аутопсиях:
·
·
·
·
·
·
4) Предварительные методы в ХТА:
·
·
5) Подтверждающие методы в ХТА:
·
·
·
6) Перечислить недостающие 3 цели пробоподготовки:
· Удалить возможные загрязнения, как для разделения, так и для детектирования (селективность).
· Увеличить концентрацию аналита (чувствительность).
· _________________________________
· _________________________________
· _________________________________
7) Перечислить стадии пробоподготовки:
___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
8) Перечисленные стадии – это _____________________________________ обработка.
· Фильтрация, центрифугирование.
· Ультразвуковая обработка.
· Разведение.
· Депротеинизация.
· Ферментативная обработка (цельной крови, плазмы).
· Гомогенизация (ткани).
9) Синоним преципитации_____________________________________________________
10) Перечисленные стадии относятся к ЖЖЭ или ТФЭ:
ЖЖЭ:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ТФЭ:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
11) Тесты для самоконтроля:
1. Метаболизм ядовитых и наркотических веществ в организме направлен на:
1) снижение растворимости в биологических жидкостях
2) снижение биологической активности
3) повышение биологической активности
4) снижение растворимости в жирах и повышение растворимости в биологических жидкостях и воде
5) повышение скорости проникновения через мембранные барьеры
2. Общее действие яда наиболее быстро и интенсивно проявляется при введении его:
1) под кожу
2) через легкие
3) в прямую кишку
4) через рот
5) внутривенно
3. Интенсивность действия яда на организм зависит от:
1) количество поступившего яда
2) длительности контакта и площади соприкосновения ткани с ядом
3) степени химического превращения яда организмом под влиянием биологически активных веществ
4) химической его природы
5) путей его поступления
4. Выделение ядов из организма производят:
1) почки
2) легкие
3) кожа
4) слизистые оболочки
5) волосы
5. Для консервации объектов, взятых для судебно-химического анализа, можно применять:
1) раствор формалина
2) метанол
3) глицерин
4) этанол
5) ацетон
6. Виды транспорта ядов через клеточные мембраны:
1) простая диффузия
2) активный транспорт
3) пиноцитоз
4) сорбция
5) фильтрация
7. Диффузия органических соединений через мембраны зависит:
1) от градиента концентрации
2) коэффициента диффузии
3) от физико-химических свойств яда
4) от рН среды
5) от связывания с протеинами
8. Распределение ядовитых веществ в организме зависит от:
1) от коэффициента распределения вещества
2) от рН биосреды
3) от растворимости в воде и липидах
4) от концентрации
5) от скорости диффузии и перфузии
9. Связывание вещества с белками ткани и крови влияет на:
1) продолжительность действия яда
2) скорость всасывания
3) скорость выведения
4) на выбор метода детоксикации
5) на выбор антидота
10. Степень связывания с белками сыворотки крови органических ядов не зависит от:
1) рН крови
2) рКа вещества
3) коэффициента распределения вещества (в системах: масло-вода)
4) характера метаболизма
5) концентрации веществ
11. Перечень наркотических средств, психотропных веществ, их прекурсоров, подлежащих контролю в РФ включает:
1) 1 список
2) 2 списка
3) 3 списка
4) 4 списка
5) 5 списков
12. Способы консервирования биожидкостей, тканей и органов при исследовании на неизвестный яд:
1) формалином
2) 96о этанолом
3) замораживание
4) гепарином
5) растворами фторида натрия
Эталоны ответов
1. -4
2. -2,3,5
3. -1-5
4. -1-5
5. -4
6. -1,2,3,5
7. -1-5
8. -1,2,3,5
9. -1-5
10. -4
11. -4
12. -2,3,5
Задания для самостоятельной работы студентов
|