Микробиологическая диагностика.

Применяется микроскопический метод диа­гностики трипаносомозов: мазки из кро­ви, пунктата шейных лимфатических узлов, цереброспинальной жидкости красят по Романовскому—Гимзе или по Райту.

Для выделения возбудителя можно зара­жать белых мышей или крыс, а также делать посев на питательные среды с кровью.

При серологическом методе определяют антитела (IgM) с помощью ИФА, РСК, не­прямой РИФи др.

Лечение.Для лечения африканского трипа­носомоза назначают сурамин или пентами-

дин, а при поражении ЦНС — меларсопрол. Лечение американского трипаносомоза неэ­ффективно.

Профилактика.Проводят неспецифическую профилактику трипаносомоза путем ликвида­ции мест выплода переносчиков возбудителя и уничтожения инфицированных животных. В личной профилактике применяют репел­ленты и защитную одежду. Также выявляют и лечат инфицированных лиц.

19.2.3. Лямблии, или гиардии (род Lamblia, или Giardia)

Лямблиоз (гиардиоз) — болезнь (инвазия), протекающая в латентной или манифестной форме в виде дисфункции кишечника с яв­лениями энтерита.

Возбудитель открыт Д. Ф. Лямблем в 1859 г. В 1915 г. возбудитель отнесен к роду Giardia в честь Жиара.

Таксономия.Лямблии (вид Lamblia intesti-nalis, или Giardia lamblia) относятся к типу Sarcomastigophorae, подтипу Mastigophora, клас­су Zoomastigophorea, отряду Diplomonadida.

Характеристика возбудителя.Вегетативная клетка лямблий плоская, имеет грушевидную форму (9/20х5/10 мкм), два ядра (рис. 19.4). Четыре пары жгутиков обеспечивают враща­тельное движение клетки. Лямблии размножа­ются путем продольного деления. Вегетативные

клетки лямблий прикрепляются к эпителиоци-там кишечника с помощью присасывательного диска. Попадая из мест обитания — из верхних отделов кишечника в менее благоприятные — нижние отделы кишечника, образуют овальные четырехъядерные цисты (10/14x6/10 мкм), ок­руженные толстой двухконтурной оболочкой.

Резистентность. Цисты лямблий, попавшие с испражнениями в окружающую среду, ус­тойчивы к низким температурам, сохраняют­ся в почве и холодной воде более 2 месяцев. Цисты не погибают при хлорировании воды, но мгновенно погибают при кипячении.

Эпидемиология. Источником инфициро­вания цистами являются люди — больные и носители, реже — собаки, бобры, олени. Механизм заражения — фекально-оральный, через загрязненные воду, пищу, руки и пред­меты обихода. Возможны водные вспышки диарей. Имеется связь (до 40 % случаев) меж­ду мужским гомосексуализмом и инфициро-ванностью лямблиями и (или) амебами.

Патогенез и клиника.Развитие лямблиоза зависит от степени резистентности организ­ма. Лямблии обитают в двенадцатиперстной и тощей кишках. Размножаясь в большом количестве, они блокируют слизистую обо­лочку, нарушая пристеночное пищеварение и моторику кишечника. Возможно также им­мунопатологическое воздействие Т-клеток на слизистую оболочку тощей кишки. Лямблии могут вызывать диарею, энтероколиты, на­рушения обмена веществ, потерю аппетита, массы тела и др. Развиваются гастроэнтеро-колитический, холецистопанкреатический и астенический синдромы.

Иммунитет.Носит клеточный и гумораль­ный характер.

Микробиологическая диагностика.При мик­роскопическом методе в мазках из испражне­ний выявляют цисты; в случае диареи — ве­гетативные формы (трофозоиты), которые также обнаруживают и при дуоденальном зондировании. Серологический метод под­тверждает наличие специфического процесса по нарастанию титра антител в РИФ.

Лечение.Применяют метронидазол, тини-дазол, фуразолидон.

Профилактика.Сходна с профилактически­ми мерами при амебиазе.

19.2.4.Трихомонады (род Trichomonas)

Трихомоноз— антропонозная болезнь (инвазия), вызываемая мочеполовой трихо-монадой (Trichomonas vaginalis); сопровож­дается поражениями мочеполовой системы.

Таксономия.Возбудитель относится к типу Sarcomastigophora, подтипу Mastigophora, клас­су Zoomastigophoreae, отряду Trichomonadida. Различают также комменсалы — ротовую (Т. tenax) и кишечную (Т. hominis) трихомонады.

Характеристика возбудителя.Trichomonas vaginalis цист не образует. Существует только как трофозо-ит, размножается делением. Имеет грушевидную форму; размеры 8/40хЗ/14 мкм. Пять жгутиков расположены на переднем конце клетки. Один из них соединен с клеткой ундулирующей мембра­ной, доходящей до середины клетки. Через клетку проходит осевая нить (аксостилъ), выходящая из заднего конца клетки в виде шипа (рис. 19.5).

Резистентность. Вокружающей среде быс­тро погибает; на банных губках и мочалках сохраняется 10—15 мин, а в слизи, сперме и моче — 24 ч.

Эпидемиология.Заболевание передается по­ловым путем, через родовые пути (младенцу), редко — через предметы личной гигиены.

Патогенез и клиника. Trichomonas vagi­nalis вызывает вагинит, уретрит, простатит. Воспалительный процесс сопровождается бо­лью, зудом, гнойно-серозными выделениями. Часто болезнь протекает бессимптомно.

Иммунитет.Не изучен.

Микробиологическая диагностика.При микро­скопическом методе выявляют трихомонады в нативных и окрашенных мазках из отделяемого мочеиспускательного канала, секрета предста­тельной железы или осадка мочи, окрашенных метиленовым синим или по Романовскому— Гимзе. При фазово-контрастной микроскопии нативных препаратов наблюдается подвиж­ность трихомонад. Нативный препарат готовят на предметном стекле, смешивая отделяемое с каплей теплого изотонического раствора хло­рида натрия. При приготовлении препарата «висячая капля» наносят каплю исследуемого материала на покровное стекло со смазанными вазелином краями, после чего его переворачи­вают каплей вниз и помещают на предметное

стекло с лункой. Препараты исследуют с объ­ективом х40 и окуляром х10. Трихомонады по размеру близки к лейкоцитам и имеют харак­терные толчкообразные движения ундулирую-щей мембраны и жгутиков.

При хронических формах трихомонады вы­ращивают на питательных средах, например СКДС (солевой раствор с гидролизатами ка­зеина, дрожжей и с мальтозой).

Лечение.Применяют метронидазол, тини-дазол, осарсол, аминарсон, фуразолидон.

Профилактика.Аналогична проводимой при венерических заболеваниях.

Споровики

Споровики (класс Sporozoa, тип Apicomplexa) включают плазмодии малярии, токсоплазмы, саркоцисты, изоспоры, циклоспоры, крип-тоспоридии, бабезии.

19.3.1. Плазмодии малярии (род Plasmodium)

Малярия — антропонозная протозойная бо­лезнь, вызываемая простейшими рода Plasmodium; сопровождается приступами лихорадки, анеми­ей, увеличением печени и селезенки.

Таксономия.Возбудители малярии человека относятся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидии), подотряду Haemosporina и видам: Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum. Впервые возбудитель малярии — P. malariae был обнаружен фран­цузским врачом А. Лавераном в 1880 г.

Характеристика возбудителя.Жизненный цикл плазмодиев происходит со сменой хо­зяев: в комаре рода Anopheles (окончательном хозяине) осуществляется половое размноже­ние, или спорогония (образование вытянутых клеток — спорозоитов), а в организме чело­века (промежуточном хозяине) происходит бесполое размножение — шизогония, точнее мерогония, при которой образуются мелкие клетки — мерозоиты.

После укуса спорозоиты из слюнных желез комара попадают в кровь и далее (в течение ча­са) — в клетки печени (гепатоциты), в которой совершается первый этап размножения — тка­невая (экзоэритроцитарная) шизогония. При этом в гепатоцитах спорозоит превращается в тканевой трофозоит (растущая клетка), ко­торый переходит в стадию тканевого шизонта (делящаяся клетка). Тканевой шизонт делится

(меруляция) с образованием тканевых меро-зоитов, поступающих в кровь. Из одного спо-розоита образуется 2000—40 000 мерозоитов. Мерозоиты проникают эндоцитозом в эритро­циты, в которых совершается несколько цик­лов эритроцитарной шизогонии. Из мерозоита в эритроците развиваются трофозоиты — расту­щие формы паразита: кольцевидный трофозо-ит юный, полувзрослый, взрослый трофозоит. Они содержат желтовато-коричневые гранулы, образующиеся из гемоглобина эритроцитов. Взрослый трофозоит превращается в много­ядерный шизонт (рис. 19.6), из которого обра­зуются 6—24 мерозоита, внедряющиеся затем в другие эритроциты. Этот процесс повторя­ется многократно. Продолжительность цикла развития в эритроцитах у P. vivax, P. ovale, P. falciparum составляет 48 ч, у P. malariae — 72 ч. В эритроцитах мерозоиты дают также начало образованию половых незрелых форм — мужских и женских гамет (гамонтов, гамето-цитов), которые способны инфицировать ко­маров при кровососании больного малярией.

Гаметы имеют овальную форму, кроме гамет P. falciparum, имеющих полулунную форму.

С началом эритроцитарной шизогонии раз­множение возбудителей в печени прекраща­ется, кроме P. vivax и P. ovale, у которых часть спорозоитов (гипнозоитов, брадизоитов) ос­тается в гепатоцитах на недели или месяцы, что обуславливает появление поздних, отда­ленных рецидивов болезни. Ранние рецидивы связаны с сохранившимися формами парази­та при эритроцитарной шизогонии.

При укусе комаром незрелые половые фор­мы возбудителя попадают вместе с кровью больного человека в желудок самки комара. В комаре гамонты приступают к гаметогонии. Они дозревают и оплодотворяются, образуя зиготу, превращающуюся в удлиненную под­вижную форму — оокинету. Оокинета прони­кает через стенку желудка и образует ооцисту, в которой завершается спорогония с образо­ванием до 10 000 спорозоитов. Часть спорозо­итов (2 %) затем попадает через гемолимфу в слюнные железы комара.

P. vivax — возбудитель трехдневной маля­рии, открыт в 1890 г. В. Грасси и Р. Фелетти. В эритроците, при окраске мазка из кро­ви по Романовскому—Гимзе, трофозоит имеет форму кольца — крупная вакуоль в центре, окаймленная голубой цитоплазмой с рубиново-красным ядром (кольцевид­ный трофозоит). Иногда в одном эритроци­те встречаются 2—3 кольца. Полувзрослый трофозоит имеет в эритроците форму амебы с псевдоподиями, подвижен (vivax — жи­вой). Пораженные эритроциты увеличены, в них выявляется многочисленная мел­кая кирпично-красная зернистость (зерна Шюффнера). В стадии деления паразита об­разуется 12—24 мерозоита.

P. malariae — возбудитель четырехднев­ной малярии открыт в 1880 г. А. Лавераном. В эритроците выявляется один трофозоит в ста­дии кольца. Полувзрослый трофозоит внутри эритроцита, в отличие от других видов, имеет лентовидную форму. Паразит делится на 6—12 мерозоитов, располагающихся упорядоченно вокруг пигмента, обычно в виде розетки.

P. falciparum — возбудитель тропической ма­лярии открыт в 1897 г. У. Уэлчем. Характерным для него является наличие юных форм па­разита в виде мелких колец в эритроците, часто по 2—3 в одной клетке. В пораженных эритроцитах выявляются единичные крупные розово-фиолетовые пятна (Мауэра). В пери­ферической крови кроме кольцевидных тро-фозоитов (другие формы трофозоитов нахо­дятся в эритроцитах капилляров) появляются гамонты в виде полулуний.

P. ovale — возбудитель трехдневной малярии открыт в 1922 г. Ж. Стивенсоном. Паразит в стадии кольца в эритроците имеет более круп­ное ядро, чем P. vivax. В эритроците выяв­ляется крупная зернистость (зерна Джеймса). Инфицированные эритроциты увеличены, часть пораженных эритроцитов имеет овальную форму. Паразит делится на 6—12 мерозоитов.

Эпидемиология.Восприимчивость людей — высокая. Малярией болеют сотни миллионов людей, живущих в странах тропического и субтропического климата: в тропиках основ­ной возбудитель — P. falciparum; спорадичес­ки — P. ovale; в регионах умеренного кли­мата малярию чаще вызывает P. vivax, реже

— P. malariae. Поэтому острой является про­блема завоза малярии в нашу страну. Очаги малярии имеются в южных регионах России.

Источник возбудителя — человек (больной или паразитоноситель). Основной механизм заражения — трансмиссивный, через укус самки комара рода Anopheles (около 30 видов). Возможен парентеральный путь передачи при гемотрансфузии.

Патогенез и клиника.Инкубационный пери­од при различных формах малярии колеблет­ся от недели до года (при трехдневной маля­рии — до 14 мес.) и заканчивается с момента появления паразитов в крови. Клинические проявления обусловлены эритроцитарной шизогонией. Малярии свойственно присту­пообразное течение: озноб с сильной голо­вной болью сменяется подъемом температуры до 39—40 "С и выше, после чего происходит быстрое снижение температуры с обильным потоотделением и выраженной слабостью. Малярийный приступ вызван выбросом пи-рогенных веществ из разрушенных эритро­цитов, мерозоитов и продуктов их метаболиз­ма. Приступы могут быть ежедневными или повторяться через 1—2 дня и приводить при длительном течении к поражению печени, селезенки и почек.

Наиболее тяжело протекает тропическая малярия. Плазмодии P. falciparum размножа­ются в эритроцитах (любого возраста) мелких сосудов внутренних органов, вызывая внутри-сосудистый гемолиз, закупорку капилляров, гемоглобинурийную лихорадку. Этот процесс усиливается в результате иммунопатологичес­кого гемолиза неинфицированных эритро­цитов. Нарушение микроциркуляции крови и гемолиз приводят к поражению мозга (ма­лярийная кома), развитию острой почечной недостаточности. Летальность— около 1%.

Иммунитет.При заболевании формирует­ся нестойкий видоспецифический, стади-оспецифический, нестерильный иммунитет. Возможны повторные заболевания. Антитела способствуют фагоцитозу пораженных эрит­роцитов и мерозоитов. Повышенный уровень противомалярийных антител класса G месяца­ми и годами сохраняется после заболевания.

Естественную резистентность отмечают у лиц, в эритроцитах которых нет антигенов

группы Duffy, а также у людей с врожден­ным дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидроге-назы, с гемоглобинопатиями (например, при серповидно-клеточной анемии).

Микробиологическая диагностика.

Диагностика основана на микроскопичес­ком исследовании препаратов крови: «толс­той капли» и мазков из крови, окрашенных по Романовскому—Гимзе или по Райту, и обнаруже­нии различных форм возбудителя (красное ядро, голубая цитоплазма). Препарат «толстая капля» окрашивают не фиксируя, поэтому эритроци­ты и плазмодии деформируются; возможность обнаружения возбудителя значительно повыша­ется. Если паразиты не обнаружены в крови, взя­той на высоте лихорадки, то повторяют исследо­вания мазков крови— через 12 часов и т. д.

В препаратах крови с неосложненной тро­пической малярией плазмодии P. falciparum не обнаруживаются, кроме кольцевидных тро-фозоитов и гамонтов полулунной формы.

Для обнаружения ДНК паразита в крови ис­пользуют ДНК-гибридизацию и ПЦР. В сероло­гическом методе применяют РИФ,РПГА, ИФА.

Лечение.Противомалярийные препараты оказывают различное действие на бесполые и половые стадии плазмодиев. Различают пре­параты шизонтоцидного (гисто- и гематоши-зонтотропного), гамонтотропного и спорозо-итотропного действия. К основным проти­вомалярийным препаратам относят: хинин, мефлохин, хлорохин (хингамин), акрихин, примахин, бигумаль, пириметамин и др.

Профилактика.Профилактические мероп­риятия направлены на источник возбудите­ля (лечение больных малярией и паразито-носителей) и на уничтожение переносчиков возбудителя — комаров. Разрабатываются вакцины на основе антигенов, полученных генно-инженерным методом (антиспорозоит-ная антимерозоитная, антигамонтная).

19.3.2.Токсоплазмы (род Toxoplasma)

Токсоплазмоз — болезнь (инвазия), вызван­ная простейшими рода Toxoplasma, сопро­вождающаяся паразитемисй и поражением различных органов. У человека клинические проявления полиморфны, заболевание про­текает хронически, част бессимптомно.

Таксономия.Возбудитель — Toxoplasma gondii, относится к типу Apicomplexa, клас­су Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидии); выделен в 1908 г. Ш. Николем и Л. Мансо в Тунисе от грызунов гонди.

Характеристика возбудителя.Toxoplasma gon­dii — облигатный внутриклеточный паразит. В жизненном цикле токсоплазм различают несколько морфологических форм (рис 19.7): ооцисты, псевдоцисты, цисты, тахизоиты.

Ооцисты формируются в результате по­лового размножения паразита в клетках слизистой оболочки кишечника кошки и представителей семейства кошачьих — окончательных хозяев токсоплазм: разно­полые гаметоциты сливаются с образова­нием ооцисты овальной формы (диаметр 10—12мкм). Ооцисты содержат по 2 спо-роцисты, в которых заключено по 4 споро-зоита. Ооцисты выделяются с фекалиями кошки и через 3 дня созревают в окружаю­щей среде. Попав в кишечник человека (на­пример, с немытыми овощами и фруктами), они освобождают спорозоиты, которые рас­пространяются по лимфатическим сосудам, размножаются внутриклеточно бесполым путем (шизогония). Размножившиеся пара­зиты (тахизоиты) внедряются затем в другие клетки. Они обнаруживаются при острой стадии инфекции.

Тахизоиты (трофозоиты) имеют характер­ную форму апельсиновой дольки или полу­месяца (размером 3x7 мкм). При окраске по Романовскому—Гимзе цитоплазма голубого цвета, а ядро — рубиново-красного.

Псевдоцисты не имеют оболочки; они об­разуются в пораженных клетках, макрофагах и содержат скопления трофозоитов (эндозои-тов). Обнаруживаются, как и тахизоиты, при острой инфекции.

Цисты (размер 10—1000 мкм) также обра­зуются внутри клеток хозяина. Они имеют плотную оболочку и содержат более сотни паразитов (цистозоиты, или брадизоиты). Цисты сохраняются десятилетиями (хрони­ческая инфекция).

Культивирование.Токсоплазмы культивиру­ют в куриных эмбрионах и на культурах тка­ней, а также путем заражения белых мышей и других животных.

Резистентность.Ооцисты могут в течение года сохранять жизнеспособность в окружа­ющей среде. Токсоплазмы быстро погибают при температуре 55 °С, высокочувствительны к 50% спирту, 5% раствору NH₄OH.

Эпидемиология.Токсоплазмы распростра­нены повсеместно. Источниками инвазии служат многие виды домашних и диких мле­копитающих, а также птицы. Заражение че­ловека происходит алиментарным путем в результате употребления в пищу термически слабо обработанных продуктов (мясо, моло­ко, яйца), содержащих в псевдоцистах и цис­тах трофозоиты (эндозоиты и цистозоиты) паразита. Животные и человек также могут инфицироваться ооцистами, выделяемыми кошками.

Реже токсоплазмы попадают контактным (через поврежденную кожу и слизистые обо­лочки) или воздушно-пылевым путями. При врожденном токсоплазмозе возбудитель про­никает в плод через плаценту. Иногда зараже­ние происходит в результате гемотрансфузии, трансплантации органов.

Патогенез и клиника.Токсоплазмы, проник­шие в организм, достигают с током лимфы регионарных лимфоузлов, размножаются в них (тахизоиты), проникают в кровь, разно­сятся по организму, попадая в клетки ретику-лоэндотелиальной системы практически всех внутренних органов, где образуют псевдоцис­ты и цисты. Токсоплазмы поражают нервные клетки, печень, почки, легкие, сердце, мыш­цы, глаза. При острой инфекции наблюда-

ются паразитемия и скопления токсоплазм в тканях в виде псевдоцист. Хроническая ин­фекция характеризуется образованием ткане­вых цист.

Инкубационный период — около 2 недель. Клиническая картина разнообразна: от уме­ренной лимфоаденопатии до лихорадки, сыпи, гепатоспленомегалии, фарингита, менингоэн-цефалита, пневмонии и др. Она зависит от ло­кализации возбудителя и поражаемого органа. При врожденном токсоплазмозе (инфицирова­ние чаще происходит в I триместре беременнос­ти) возможны гибель плода, самопроизвольный выкидыш или мертворождение, рождение де­тей с дефектами развития. Поражаются печень, селезенка, лимфоузлы, ЦНС на фоне выражен­ной интоксикации и лихорадки.

Иммунитет.При заболевании развива­ется клеточный и гуморальный иммунитет. Развивается ГЗТ. При врожденном токсоплаз­мозе в крови матери и ребенка выявляется высокий уровень специфических антител.