ТАБЛЕТКИ ВЕРАПАМИЛА ГИДРОХЛОРИДА.

Идентификация

1. Метод ТСХ. 0,01 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 10 мл хлороформа в течение 3 минут и фильтруют. 0,01 мл (5мкг) полученного раствора наносят микропипеткой на линию старта пластины «Силуфол УФ-254» размером 7/15 см. Рядом в качестве свидетеля наносят 5 мкл 0,25% раствора верапамила гидрохлорида в хлороформе.

Пластину с нанесенными пробами подсушивают на воздухе в течение 5 минут, затем помещают в камеру со смесью растворителей хлороформ – этанол - 25% раствор аммиака (95:5:0,2) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластины, ее вынимают, подсушивают на воздухе в течение 10 минут, а затем помещают в камеру хлорирования над смесью насыщенный раствор калия перманганата - кислота хлороводородная (1:1). Через 5 минут пластину вынимают, выдерживают на воздухе в течение 15 минут и опрыскивают раствором о-толидина.

Пятно на хроматограмме от испытуемого раствора должно находиться на том же уровне, что и пятно свидетеля.

Приготовление раствора о-толидина. 160 мг о-толидина растворяют в 30 мл кислоты уксусной ледяной в мерной колбе вместимостью 500 мл, доводят объем раствора водой до метки и прибавляют 1 г калия иодида.

2. Спектр поглощения раствора, приготовленного для количественного определения, в области от 220 до 350 нм имеет максимумы при 229 ± 2 нм и 278 ± 2 нм.

3. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 20 мг верапамила гидрохлорида взбалтывают с 2 мл воды и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл 6,5% раствора ртути (II) хлорида; образуется белый осадок.

4. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 20 мг верапамила гидрохлорида взбалтывают с 2 мл воды и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,5 мл 10% раствора кислоты серной и 4 капли 1% раствора калия перманганата; образуется фиолетовый осадок, который постепенно растворяется с образованием желтого раствора.

5. 0,2 г лимонной кислоты взбалтывают с 10 мл уксусного ангидрида. К 1 мл супернатантной жидкости прибавляют количество порошка растертых таблеток, содержащее 20 мг верапамила гидрохлорида, и нагревают на водяной бане; образуется пурпурное окрашивание.

6. 0,1 г порошка растертых таблеток встряхивают с 5 мл воды и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,5 мл раствора натрия гидроксида; тотчас выпадает осадок белого цвета. Через 5 минут осадок отфильтровывают, а к фильтрату прибавляют 1 мл кислоты азотной разведенной и 1 мл раствора серебра нитрата; образуется белый творожистый осадок.

Количественное определение

Количество порошка растертых таблеток, содержащее 0,1 г верапамила гидрохлорида (точная навеска), помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 150 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной и встряхивают в течение 10 минут. Затем объем раствора доводят до метки тем же растворителем и фильтруют. 10 мл фильтрата разводят водой в мерной колбе вместимостью 100 мл до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме при длине волны 278 нм (раствор сравнения: смесь 1 мл 0,1 М кислоты хлороводородной и 9 мл воды).

Содержание верапамила гидрохлорида в одной таблетке в граммах (X) рассчитывают по формуле:

где

D - оптическая плотность испытуемого раствора;

Р - средний вес одной таблетки в граммах;

- удельный показатель поглощения верапамила гидрохлорида в максимуме при 278 нм, равный 118;

а - навеска препарата в граммах;

– разведение.

Содержание верапамила гидрохлорида в одной таблетке должно быть 0,036-0,044 г (таблетки по 0,04 г) или 0,072 - 0,088 г (таблетки по 0,08 г).

ТАБЛЕТКИ ЛЕВОДОПЫ

Идентификация

1. Метод ТСХ. 0,01 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 10 мл хлороформа в течение 3 минут и фильтруют. 0,01 мл (5мкг) полученного раствора наносят микропипеткой на линию старта пластины «Силуфол УФ-254» размером 7x15 см. Рядом в качестве свидетеля наносят 5 мкл 1% раствора леводопы в 1 М кислоте хлороводородной.

Пластину с нанесенными пробами подсушивают на воздухе в течение 5 минут, затем помещают в камеру со смесью растворителей н-бутанол - кислота уксусная ледяная - вода (50:25:25) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластины, ее вынимают, подсушивают на воздухе, а затем опрыскивают свежеприготовленным раствором равных объемов 10% раствора железа (III) хлорида и 5% раствора калия феррицианида.

Пятно на хроматограмме от испытуемого раствора должно находиться на том же уровне, что и пятно свидетеля.

2. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 20 мг леводопы, взбалтывают с 5 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, прибавляют 0,1 мл раствора железа (III) хлорида; появляется зеленое окрашивание. К половине полученного раствора прибавляют избыток 5 М раствора аммиака; образуется пурпурное окрашивание. К другой половине прибавляют избыток 5 М раствора натрия гидроксида, появляется красное окрашивание.

3. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 5 мг леводопы, взбалтывают с 5 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной и 5 мл воды, фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,1 мл 10% раствора натрия нитрита, содержащего 10% аммония молибдата; появляется желтое окрашивание, переходящее в красное от прибавления 10 М раствора натрия гидроксида.

4. К количеству порошка растертых таблеток, содержащему 10 мг леводопы, прибавляют 2 мл воды, 0,5 мл раствора хлорамина, 1 мл кислоты хлороводородной разведенной; появляется желто-оранжевое окрашивание.

5. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 5 мг леводопы взбалтывают с 5 мл воды, прибавляют 0,5 мг нингидрина и нагревают на водяной бане в течение 10 минут; появляется сине-фиолетовое окрашивание.

6. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 5 мг леводопы, смешивают с 1 мл пиридина, прибавляют 5 мг 4-нитробензоилхдорида и оставляют на 3 минуты; появляется фиолетовое окрашивание, переходящее в светло-желтое при кипячении. Прибавляют при перемешивании 02 мл 10% раствора натрия карбоната; фиолетовое окрашивание появляется вновь.

7. К количеству порошка растертых таблеток, содержащему 10 мг препарата, прибавляют 2 капли раствора калия феррицианида, 1 мл воды, 2 капли раствора натрия гидроксида; появляется красно-оранжевое окрашивание с желто-зеленой флуоресценцией.

Количественное определение

Количество порошка растертых таблеток (точная навеска), содержащее 30 мг леводопы, растворяют в 0,1 М растворе кислоты хлороводородной в мерной колбе вместимостью 100 мл, объем раствора доводят до метки тем же растворителем и фильтруют. 10 мл фильтрата разводят в мерной колбе на 100 0,1 М раствором кислоты хлороводородной.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме при длине волны 280 нм на фоне 0,1 М раствора кислоты хлороводородной.

Содержание леводопы в одной таблетке в % от прописанного количества (X) рассчитывают по формуле:

где

D - оптическая плотность исследуемого раствора;

Р - средний вес одной таблетки в граммах;

а - навеска препарата в граммах;

b - прописанное количество леводопы в одной таблетки в граммах:

- удельный показатель поглощения леводопы при 280 нм; равный 140;

– разведение.

Таблетка должна содержать 95% - 105% от прописанного количества леводопы.

ТАБЛЕТКИ МЕТИЛДОПЫ

Идентификация

1. К количеству порошка растертых таблеток, содержащему 2 метилдопы, прибавляют 3 мл воды и 1 каплю раствора железа (III) хлорида, появляется зеленое окрашивание. К половине полученного раствора прибавляют избыток 5 М раствора аммиака; появляется пурпурное окрашивание. К другой половине прибавляют избыток 5 М раствора натрия гидроксида, образуется красное окрашивание.

2. К количеству порошка растертых таблеток, содержащему 10 метилдопы, прибавляют 1 мл 0,5% раствора кислоты серной, 2 мл воды, 3 мл 10% раствора аммония молибдата и перемешивают, появляется золотисто-желтое окрашивание. При помешивании прибавляют 2 мл 20% раствора натрия гидроксида, образуется розовое окрашивание.

3. К количеству порошка растертых таблеток, содержащему 40 мг метилдопы, прибавляют 5 мл воды и 2 мл реактива Фелинга (равные количества растворов Фелинга 1 и 2) и нагревают, раствор становится зеленым и выпадает оранжево-красный осадок.

Количественное определение

Количество порошка растертых таблеток (точная навеска), содержащее 0,1 г метилдопы, растворяют как можно полнее в 0,05 М растворе кислоты cepнoй в мерной колбе вместимостью 100 мл, объем раствора доводят до метки тем же растворителем и фильтруют. 5 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 2 мл железо-цитратного реактива, 8 мл аминоуксусного буферного раствора и объем раствора доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора в максимуме при длине волны 545 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (раствор сравнения - вода).

Параллельно выполняют определение с 5 мл 0,1% стандартного раствора метилдопы, начиная со слов «5 мл фильтрата...».

Содержание метилдопы в таблетке в процентах от прописанного количества (X) рассчитывают по формуле:

где

D_x - оптическая плотность испытуемого раствора;

D_o - оптическая плотность стандартного раствора;

С_о- концентрация стандартного раствора в г/мл (0,001 г/мл);

P - средний вес одной таблетки в граммах;

а - навеска препарата в граммах;

b - прописанное количество метилдопы в одной таблетке в граммах;

W - разведение.

Таблетка должна содержать 95%-105% от прописанного количества метилдопы.